高效液相色谱法的流动相使用前必须经过过滤（气相液相色谱仪使用方法）

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高效液相色谱法的流动相使用前一定要经过过滤 有机溶液用滤膜过滤 水溶液用什么滤膜过滤？

高效液相色谱法的流动相使用前一定要经过过滤 ，有机溶液用滤膜过滤， 水溶液同样也用滤膜过滤，只不过有机溶液过滤使用的是脂溶性滤膜，而水溶液过滤使用的是水溶性滤膜。二者不可混用。因为假设用脂溶性滤膜过滤水溶液，则流速低或滤不动。水溶性滤膜过滤有机溶剂，则滤膜会被溶解。

液相色谱仪使用方式？

1、开机设定参数（检测波长、流速），更改替换所需流动相，检查色谱柱是不是正确。

2、排液置换管路中流动相，冲洗进样阀，洗好进样针。

3、冲洗色谱柱进行平衡，其间可早一点进行样品的处理，样品信息的注册。

4、平衡好以后进空白试验，应该排除系统污染。

5、柱子稳定好以后进样，等着运行结束（其间清洗进样针），积分计算，出具报告。

液相色谱法用什么溶剂？

液相色谱法经常会用到的溶剂就是色谱甲醇和色谱乙腈，这两个是最经常会用到的。

高效液相色谱仪使用中需注意的哪些问题？

在使用高效液相色谱仪中一定要注意这哪些问题

高效液相色谱仪是分析实验室经常会用到的测试仪器之一，其应用越来越广泛。此种仪器在使用途中，难免出现各自不同的各样的问题，并将直接影响到所测数据的准确性和仪器的正常工作。操作者假设能了解故障的成因，就可以了解预防和排除这些故障的出现，就可正确地使用仪器并最大限度地发挥仪器的性能。今天我们要从以下哪些方面和您分享下在使用高效液相色谱仪中需注意的哪些问题。

1、使用试管的问题：

a、试管的洁净问题：高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方式，假设因使用不洁净的试管，便会影响试验结果的准确性。比如，在用甲醇作溶剂来溶解样品时，所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的，因为这个原因，在每一次进样时，都拥有一个保留时间固定的干扰峰存在，后经证实，此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所出现，换用玻璃试管后，干扰峰消除。

b、塑料试管的溶解问题：最近几年来，一次性塑料试管给试验人员带来了非常大的方便，但是在使用途中一定要注意有机溶剂对试管的溶解情况，在利用此种试管提取样品时，有部分有机溶剂对管壁有溶解情况，这些被溶解下来的物质有的时候，也可以在检测器上出现信号，以此干扰样品的测定。这时，可用一样的实验条件先行试验一下，看看不含被抽提物时，提取液在检测器上能不能出现干扰信号，如确有干扰信号存在，就只可以换用耐有机溶剂的玻璃试管了。

c、被测样品在试管壁上的吸附问题：这个问题也应导致注意，不然也会影响测试结果的准确性，在治疗药物监测中，有部分被测药物如阿米替林，丙咪嗪等易吸附在玻璃试管的管壁上，因为这个原因，操作中宜采取聚丙烯管，为防止提取中吸附情况的出现，可采取0.5%的已二胺已烷液做为提取剂，可有效地防止吸附。

2、流动相的问题：

a、流动相的过滤：配制好的流动相在使用前一定要先用0.5um孔径的微孔滤膜来过滤。这是因为溶液中含有不少肉眼很难发现的微小颗粒，假设不把它们滤除掉，就可以堵塞泵口、柱头上的过滤器，这样就堵塞了流动相的正常入口通道，使色谱柱的阻力增多，柱压升高，柱效下降。撞见这样的情况时，要换用经过滤的流动相，并将堵塞的滤器拆下来浸泡在百分之20的硝酸水溶液中以超声波清洗机清洗20分钟，以除去滤片上的堵塞物。

b、流动相的脱气：流动相在使用前一定要脱气，以尽量的除去溶解在流动相中的气体，不然，这些气体会使柱填料的性能降低，还可以对检测器的信号出现很大的干扰。脱气有各种方式，如超声脱气、真空脱气、氮气脱气等。真空脱气法和氮气流脱气法是现在经常会用到的脱气法。水和甲醇混合后会出现非常多的气泡，假设不脱气就使用，气泡就可以进入色谱柱和检测器，并将影响分析工作的正常进行。

2.高效液相色谱采取5~10µm粒度的固定相有何优点缺点,如何克服？

粒径越小，柱效越高，但压力也高，另外也容易堵塞。

高效液相色谱法测定对象？

高效液相色谱的应用很广泛、基本上全部的有机化合物和无机物都可以测定！高效液相色谱的分支也非常多、例如离子色谱就是其非常的重要的分支、离子色谱可以测定故此，阴阳离子、而且，速度很快！

高效液相色谱法流动相用什么水是纯净水还是蒸馏水？

你可以 买市面上卖的哇哈哈纯净水，我们做实验都用它。自制的双蒸水也可，但假设容器不干净容易混进杂质或干扰离子

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